特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱：亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣

檢測(cè)方法：微量法

產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6480

產(chǎn)品分類：氮代謝系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

50T 副豬嗜血桿菌定量PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

V-P試劑盒  5ml*4

1瓶 Lec1細(xì)胞株 Lec1 低溫運(yùn)輸和保存

改良麥康凱肉湯添加劑 Modified MacConkey Broth Additives 1ml*5支

100mg 膠原Ⅰ型 Collagenase TypeⅠ 4℃保存

250mL Stripping Buffer,4X Stripping Buffer,4X 常溫保存

100次 一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒 One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit 4℃保存

2 ug pSIREN-RetroQ-ZsGreen pSIREN-RetroQ-ZsGreen 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

100mL Oligo（dT）再生溶液 Oligo (dT) Recharger 常溫避光保存

2 ug pCMV-SPORT6 FLJ21908 pCMV-SPORT6 FLJ21908 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

CHO培養(yǎng)基基礎(chǔ) CHO Medium Base 250g

亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒微量法Phospho-Ret (Tyr905)  磷酸化指狀蛋白R(shí)ET抗體 規(guī)格: 0.1ml

FAM161B  FAM161B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-BRCA1(Ser1524)  磷酸化易基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml

HAUSP/USP7  皰疹毒相關(guān)泛素特異性蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2mlTRAILR2/DR5/CD262  瘤細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗體 規(guī)格: 0.1ml

GDN/SERPINE2  膠質(zhì)源性連接蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlGPBB/PYGB  腦糖原磷酸化抗體 規(guī)格: 0.2ml

FBXL5  FBXL5蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlARSA  芳香基硫酸酯1抗體 規(guī)格: 0.2ml

RNASE4/Angiogenin  管生成素核糖核酸4抗體(肌萎性側(cè)索硬化癥蛋白) 規(guī)格: 0.1mlBcl2A1  BCL2相關(guān)蛋白A1抗體 規(guī)格: 0.1ml

DR3/APO3/TWEAK  死亡受體3抗體 規(guī)格: 0.1mlArfaptin 2  ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

ADAM11  去整合素樣金屬蛋白11抗體 0.2mlPAK1  p21激活激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-DARPP32(Thr34)  磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlIKAROS  鋅指蛋白IKAROS抗體 規(guī)格: 0.2ml

Aurora A/ARK-1/AURKA  有絲分裂激A抗體 規(guī)格: 0.1mlKAT2B/ GCN5/PCAF  組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移PCAF抗體 規(guī)格: 0.1ml

CK8  細(xì)胞角蛋白8抗體 規(guī)格: 0.1mlMAGEF1  黑色素瘤抗原F蛋白家族1抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項(xiàng)：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。