操作步驟：

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

我司供應(yīng)的產(chǎn)品僅供科研使用，下列是產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品全稱：PP 小鼠蛋白磷酸酶ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱：PP ELISA Kit

貨號(hào)：BKE6684

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，以及產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供。

試劑配制：

1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。

2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
售后服務(wù)：

組成及試劑配制 :

1. 酶聯(lián)板：一塊(96孔)

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。

如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。

4. 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml/瓶。

5. 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml/瓶。

6. 檢測(cè)溶液A：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔)，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

7. 檢測(cè)溶液B：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。

8. 底物溶液：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

IgM 小鼠免疫球蛋白MELISA檢測(cè)試劑盒  IgM ELISA Kit

BNP 小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽ELISA檢測(cè)試劑盒  BNP ELISA Kit

IgG 小鼠免疫球蛋白GELISA檢測(cè)試劑盒  IgG ELISA Kit

IgE 小鼠免疫球蛋白EELISA檢測(cè)試劑盒  IgE ELISA Kit

TE 小鼠端粒酶ELISA檢測(cè)試劑盒  TE ELISA Kit

LTB4 小鼠白三烯B4ELISA檢測(cè)試劑盒  LTB4 ELISA Kit

IL-1β 小鼠白介素1β ELISA檢測(cè)試劑盒  IL-1β ELISA Kit

EGF 小鼠表皮生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒  EGF ELISA Kit

IL-1 小鼠白介素1ELISA檢測(cè)試劑盒  IL-1 ELISA Kit

Col Ⅰ 小鼠Ⅰ型膠原ELISA檢測(cè)試劑盒  Col ELISA Kit

PP 小鼠蛋白磷酸酶ELISA檢測(cè)試劑盒50T 質(zhì)型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

10mg 化丙啶干粉 PI Powder -20℃干燥避光保存

100mL Imidazole Buffer（咪唑緩沖液）,0.5M,pH6.0  Imidazole Buffer,0.5M,pH6.0  常溫保存

200uL ROX參考染料 ROX Reference Dye 4℃或-20℃避光保存

2 ug pLVCT-tTR-KRAB pLVCT-tTR-KRAB 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

鐵瓊脂  250g

1瓶 NCI-H446細(xì)胞株 NCI-H446 低溫運(yùn)輸和保存

菌種和底層瓊脂 Medium I(foe Seed and Basal Layer) 250g

100g 水解乳蛋白 Bacto TC Lactalbumin Hydrolysate 室溫保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.4   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.4   常溫保存

1mg 肽S 轉(zhuǎn)移 GST(Glutathione S-Transferase) -20℃保存